在生命科學(xué)的微觀世界里，細(xì)胞凋亡檢測對剖析疾病機(jī)理、研發(fā)藥物至關(guān)重要。諸多檢測方法各展其長，共同揭開凋亡神秘面紗。

　　形態(tài)學(xué)觀察是基礎(chǔ)“視窗”。光學(xué)顯微鏡下，經(jīng)特定染色（如吉姆薩染色），凋亡細(xì)胞體積縮小、核質(zhì)濃縮，與周圍正常細(xì)胞形成鮮明對比；熒光顯微鏡利用霍echst等染料，讓凋亡細(xì)胞核亮起藍(lán)白熒光，呈致密塊狀或碎片狀，直觀呈現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)異變，為初步判斷提供依據(jù)。電子顯微鏡則更進(jìn)一步，超高倍放大下，清晰可見凋亡細(xì)胞膜出芽、氣泡狀結(jié)構(gòu)，線粒體腫脹皺縮，從細(xì)微處洞察凋亡特征。

　　生化檢測聚焦關(guān)鍵“分子信標(biāo)”。DNA瓊脂糖凝膠電泳是經(jīng)典手段，凋亡細(xì)胞內(nèi)核酸內(nèi)切酶激活，切割DNA形成180-200bp整數(shù)倍寡核苷酸片段，電泳后呈梯狀條帶，如同分子梯田，確鑿指示凋亡發(fā)生。TUNEL法借助末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶，標(biāo)記凋亡細(xì)胞斷裂DNA的3'-OH末端，顯色或熒光示蹤，高靈敏揪出凋亡“痕跡”，哪怕早期凋亡也無所遁形。
 

　　流式細(xì)胞術(shù)堪稱“高效安檢儀”。用AnnexinV-FITC/PI雙染試劑，AnnexinV可特異性結(jié)合凋亡細(xì)胞外翻的磷脂酰絲氨酸，F(xiàn)ITC熒光標(biāo)記使其在流式圖中顯綠色，PI則進(jìn)入壞死細(xì)胞染色質(zhì)紅，依據(jù)雙色信號，精準(zhǔn)區(qū)分活細(xì)胞、早期凋亡、晚期凋亡與壞死細(xì)胞，快速定量分析，每小時(shí)能處理數(shù)千個(gè)細(xì)胞，為大規(guī)模樣本研究“提速”。

　　此外，Caspase活性檢測直擊凋亡“執(zhí)行蛋白”。通過比色法、熒光法測定Caspase家族成員活性，因凋亡時(shí)這些關(guān)鍵酶被激活，催化底物顯色或發(fā)熒光，反映凋亡進(jìn)程程度。

　　從形態(tài)甄別到分子追蹤、蛋白活性洞察，細(xì)胞凋亡檢測方法多元互補(bǔ)，科研者“多管齊下”，方能精準(zhǔn)洞悉細(xì)胞凋亡奧秘，推動生命科學(xué)邁向新程。